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新型肺炎怎么进行核酸检测 为什么核酸检测这么慢
2022-07-11

新型肺炎的确诊是通过核酸检测来确定的,但是很多人等核酸检测就要等好几天才能确定,那么为什么新型肺炎要通过核酸检测才能确诊呢,八宝网小编就来解答吧。

新型肺炎怎么进行核酸检测

采样

据了解,我市自试剂盒批量到位之后,火速制定了一套核酸检测的操作流程:各医院负责采集疑似病例的临床标本,由指定的标本运输机构将标本送至具备检测资质的机构开展实验室病原检测。

转运

市疾控中心是我市具备高致病性病原微生物检测能力的机构之一。该中心病原生物检验所所长熊燕介绍,从采样、转运、到实验室检测,有一系列严格的操作流程。

疑似病例样本自采集后被放入专门的转运箱,严格三层包装,且内部温度在4℃左右,运输途中确保生物安全。

市疾控中心24小时全天收样,在收到样本后,第一时间由病原生物检验所技术人员开展检测,实验室完成一轮检测需5-6小时,而全天需开展三到四轮检测,检验人员连轴转不停歇,确保从接收核对样本、开展检测到报告结果全程不超过24小时。

检测

1月30日,记者在这里看到,标本采集后,在生物安全二级实验室(P2实验室)生物安全柜内分装,实验室内处于负压状态,严格遵照生物安全要求。

技术人员是直接与病毒“面对面”的人,他们身穿防护服、头戴护目镜,按照生物安全三级实验室的个人防护标准,全副武装进入实验室,在生物安全柜内小心翼翼打开待检样本,提取核酸,再进行实时荧光RT-PCR检测。

“脱下即报废”,大家尽可能节约每一件防护服,不喝水、少吃东西,避免上厕所。长时间闷在防护服里,出来常常是一身汗,超负荷工作状态下必须更强化安全意识。

团队每一位成员几乎处于透支状态,他们放弃与家人团聚,有的借住在附近保证及时上岗,有的吃住在办公室,全员倒班确保样本检测24小时不停步。经过技术人员的努力,这里的日检测量迅速从200份提升至360份。

为什么核酸检测这么慢

大概流程应该是:RNA提取—RTPCR(将RNA反转录成cDNA)—PCR扩增(2019-nCoV特异引物)—核酸电泳检测(或者测序)。

原理大概就是把RNA提取出来,反转录成双链的DNA,再用特异性的只能扩增新冠的引物,对样品进行扩增(目的是为了将信号放大数倍),然后再用核酸电泳检测扩增产物中是否有新冠病毒。核酸电泳就是块琼脂糖做的凝胶(琼脂山楂条。。。),插上电之后,不同长短的DNA跑得速度不一样,就可以分离和检测PCR产物。这是我以前做实验的电泳结果照片,最右边的条带是Marker,指示长短的。

至于测序,我寻思三代测序技术,这个新冠的长度直接拿PCR产物测也可以了吧?我打不开NCBI,没法看这个序列。估计太多人宅家里上网了。实在不行,胶回收的DNA也可以测吧?应该效率还比较高。

我是做植物的,我们那个植物RNA特别难提取,我一天提25个样品,每个样品4个重复,也就是每天100管RNA,简直劳模了。动物就算快点,整个RNA,再做PCR,要把那么微量的RNA或cDNA信号放大,也要几十个循环,怎么也得半天。再加上仪器也有限啊,我寻思疾控中心医院也不会每家买几个PCR仪放着吧。。。

所谓试剂盒,也就是这过程中用的试剂你都不要一个一个自己配了,全配好的,按配方加进去就行了。但已经是很大的进步了,我之前在德国的实验室,买不起试剂盒,整个啥都要自己配,相当于别人拿到了高等食材做的料包,你还的自己摘花椒。试剂盒也比较好用,好的酶错配率低。

知道大家心急,但已经很好了,已经很快了。

相关部门的解答

前期样本检测流程,首诊医院通过规范的预检分诊,结合临床检查、实验室检查和胸部影像检查,经专家组会诊后确认疑似病例并采样,由辖区疾控中心将样本转运到市疾控中心,市疾控中心转运到省疾控中心进行核酸检测,每天可检测样本200多份。(1月16日之前我省没有试剂盒,还需要送到国家指定的检测机构进行病毒分离和核酸检测),预计从采样开始到结果返回,当前需要2天左右的时间( 1月16日之前,样本需送到国家指定的位于北京的检测机构,结果返回需要3~5天)。 ”